CD73 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-423919-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD73O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CD73 (m) e o Plasmídeo Double Nickase CD73 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Nt5e. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD73 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-423919-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD73 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-423919-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene murino Nt5e codifica a CD73 (ecto-5′-nucleotidase), uma ectoenzima ancorada por GPI que catalisa a desfosforilação do AMP extracelular em adenosina, moldando a sinalização purinérgica e o metabolismo de nucleotídeos no microambiente tecidual. Ao controlar a disponibilidade local de adenosina, a CD73 influencia a sinalização ligada ao cAMP, os estados de ativação de células imunes, a biologia da barreira endotelial e respostas associadas à hipóxia. A atividade da CD73 integra-se ao eixo ATP–adenosina juntamente com a CD39 e os receptores de adenosina para regular inflamação, remodelamento vascular e adaptação metabólica. A expressão ou atividade desregulada da CD73 está implicada em modelos de inflamação crônica, lesão isquêmica, fibrose e imunossupressão associada a tumores, sustentando sua relevância em estudos mecanísticos.
CD73 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Nt5e em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Nt5e. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Nt5e. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Nt5e interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.