CD63 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419564

概要

Cd63 は、後期エンドソーム、リソソーム、ならびに細胞外小胞に豊富に存在するテトラスパニンである CD63 をコードしており、テトラスパニンが集積したマイクロドメインを形成して、膜タンパク質の輸送を調整します。CD63 は、エンドソーム成熟、多胞体（MVB）形成、エクソソームへのカーゴ選別、受容体ターンオーバーの制御に関与し、細胞接着、細胞移動、免疫細胞シグナル伝達などの過程に影響を与えます。インテグリンや他のテトラスパニンとの相互作用を介して、CD63 は抗原提示や細胞間コミュニケーションを形作る小胞輸送経路にも影響します。小胞ダイナミクスや腫瘍微小環境シグナル伝達と密接に関連することから、CD63 の発現量や局在の変化は、がん生物学、炎症、感染症モデルにおいてしばしば評価指標として用いられます。

CD63 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCd63遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Cd63内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Cd63のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CD63タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CD63シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Cd63欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CD63の機能に不可欠なCd63エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Cd63ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CD63 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCD63 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Cd63遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CD63 HDRプラスミド（m）および CD63 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCd63ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCd63標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。