Partículas Lentivirales de Activación (h) CD55: sc-400738-LAC

CD55 (factor acelerador de la degradación, DAF) es un regulador de la cascada del complemento anclado a la superficie celular mediante glicosilfosfatidilinositol, que desestabiliza las convertasas de C3/C5 para limitar la amplificación del complemento en las membranas del huésped. Al controlar la activación del complemento, CD55 influye en la vigilancia inmunitaria innata, la señalización inflamatoria y las interacciones célula–célula en la sinapsis inmunológica, y puede modular la susceptibilidad al estrés dependiente del complemento. La expresión alterada de CD55 se ha asociado con desregulación inmunitaria y patobiología inflamatoria, y se estudia con frecuencia en el contexto del daño tisular mediado por el complemento y de los mecanismos de evasión inmunitaria tumoral. Como proteína de membrana de amplia expresión, CD55 también se utiliza como marcador en estudios del tráfico de glicoproteínas de superficie celular y de la organización de microdominios.

Las partículas de activación lentiviral CD55 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de CD55 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral CD55 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción CD55, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de CD55. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo CD55 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.