CD52 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403151

概要

CD52は、グリコシルホスファチジルイノシトール（GPI）アンカー型の細胞表面糖タンパク質であり、成熟リンパ球に高発現しています。脂質ラフト内で膜の構造化や免疫細胞シグナル伝達に関与します。CD52はペプチドコア自体は短いものの、高密度の糖鎖修飾を有しており、これが受容体のクラスター形成、細胞間相互作用、造血系細胞における活性化刺激への応答性に影響し得ます。CD52の発現はリンパ球の分化や免疫恒常性と密接に関連しているため、免疫細胞状態や白血球生物学の研究における有用なマーカーとなっています。CD52発現の異常や免疫環境との関連は、血液悪性腫瘍や炎症性の状況にわたって報告されており、免疫制御の機序解明における重要性を裏付けています。

CD52 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCD52遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CD52内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CD52のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CD52タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CD52シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CD52欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CD52の機能に不可欠なCD52エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CD52ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CD52 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCD52 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CD52遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CD52 HDRプラスミド（h）および CD52 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCD52ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCD52標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。