Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CD362/SDC2/Syndecan-2 Double Nickase Plasmid (h): sc-401392-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das CD362/SDC2/Syndecan-2 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- CD362/SDC2/Syndecan-2 Double-Nickase-Plasmid (h) und CD362/SDC2/Syndecan-2 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf SDC2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: CD362/SDC2/Syndecan-2: sc-365624
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
CD362/SDC2/Syndecan-2 Double Nickase Plasmid (h) | sc-401392-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD362/SDC2/Syndecan-2 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401392-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SDC2 kodiert Syndecan-2 (CD362), ein transmembranes Heparansulfat-Proteoglykan, das Zell–Matrix-Interaktionen organisiert, indem es an der Zelloberfläche Komponenten der extrazellulären Matrix und Wachstumsfaktoren bindet. Über seine Heparansulfatketten und sein zytoplasmatisches PDZ-Bindemotiv beeinflusst Syndecan-2 die integrinabhängige Adhäsion, die Dynamik fokaler Adhäsionen und den Umbau des Aktinzytoskeletts und wirkt sich damit auf Migration und Proliferation aus. SDC2 ist an Signalnetzwerken beteiligt, darunter FGF-, VEGF- und Wnt-bezogene Signalwege, indem es die Ligandenverfügbarkeit und den Aufbau von Rezeptorkomplexen moduliert, mit nachgeschalteten Effekten auf die MAPK/ERK- und PI3K-AKT-Signalgebung. Eine dysregulierte SDC2-Expression oder -Shedding wurde in mehreren Krebsarten mit veränderten Stromainteraktionen und invasiven Phänotypen in Verbindung gebracht, was SDC2 für Studien zur Kommunikation im Tumormikromilieu, zur angiogenen Signalübertragung und zu metastaseassoziiertem Zellverhalten relevant macht.
CD362/SDC2/Syndecan-2 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des SDC2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von SDC2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die SDC2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit SDC2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.