CD362/SDC2/Syndecan-2 Double Nickaseプラスミド (h): sc-401392-NIC

SDC2は、細胞膜貫通型のヘパラン硫酸プロテオグリカンであるシンデカン-2（CD362）をコードしており、細胞表面で細胞外マトリックス（ECM）成分や増殖因子に結合することで、細胞—マトリックス相互作用を組織化します。シンデカン-2は、ヘパラン硫酸鎖および細胞質側のPDZ結合モチーフを介して、インテグリン依存的な接着、フォーカルアドヒージョンの動態、アクチン細胞骨格の再構築に影響を与え、細胞の遊走や増殖に作用します。さらに、リガンドの可用性や受容体複合体の形成を調節することにより、FGF、VEGF、Wnt関連経路などを含むシグナル伝達ネットワークに関与し、下流のMAPK/ERKおよびPI3K-AKTシグナルにも影響を及ぼします。SDC2の発現異常やシェディング（膜からの切断・遊離）は、複数のがんにおいて間質との相互作用の変化や浸潤性表現型と関連づけられており、腫瘍微小環境におけるクロストーク、血管新生シグナル、転移に関連する細胞挙動の研究において重要な分子です。

CD362/SDC2/Syndecan-2 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における SDC2 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、SDC2内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、SDC2の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。

編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、SDC2が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。