CD33 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m2): sc-419543-KO-2

概要

Cd33 は、シアル酸結合性免疫グロブリン様レクチン（Siglec）である CD33 をコードしており、主に骨髄系細胞に発現します。CD33 は抑制性受容体として働き、自然免疫の活性化の度合いを調整する役割を担います。免疫受容体チロシン抑制モチーフ（ITIM）を介して、CD33 は SHP-1／SHP-2 などのホスファターゼをリクルートし、パターン認識受容体をはじめとする活性化シグナルの下流を抑制することで、サイトカイン産生、貪食、炎症の基準レベルを形作ります。マウスの研究系では、Cd33 はミクログリアやマクロファージの制御回路（シアリル化に依存した「自己」認識や糖鎖に基づく免疫チェックポイントを含む）を解析するために広く用いられています。CD33 の活性や発現の変化は、神経炎症など免疫介在性疾患の文脈における骨髄系応答の破綻と関連しており、免疫恒常性の機構研究における重要なノードとなります。

CD33 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）は、mouse細胞株におけるCd33遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Cd33内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Cd33のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CD33タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CD33シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Cd33欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CD33の機能に不可欠なCd33エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Cd33ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CD33 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCD33 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Cd33遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CD33 HDRプラスミド（m）および CD33 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCd33ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCd33標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。