Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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CD300A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-416522
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD300A O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CD300A, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD300A Anticorpo (MEM-260): sc-101318
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD300A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-416522 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CD300A (também conhecido como IRp60) codifica um receptor da superfamília das imunoglobulinas expresso predominantemente em células mieloides, incluindo monócitos, macrófagos e subpopulações de células dendríticas. Por meio de motivos inibitórios baseados em tirosina do imunorreceptor (ITIMs) na sua cauda citoplasmática, o CD300A recruta fosfatases como SHP-1/2 para atenuar cascatas de sinalização ativadoras e modular a produção de citocinas, a fagocitose e as respostas a complexos imunes. A sinalização do CD300A interage com vias de receptores da imunidade inata, definindo limiares para a ativação inflamatória e a comunicação entre células em microambientes teciduais. Alterações na expressão ou na sinalização do CD300A têm sido associadas a inflamação desregulada e a perturbações da homeostase imune em contextos como doenças autoimunes e alérgicas e em pesquisas de imunologia tumoral.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CD300A (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CD300A em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CD300A, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CD300A na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CD300A.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CD300A para a investigação da sinalização de CD300A, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CD300A críticos para a função CD300A
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CD300A para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CD300A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CD300A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CD300A. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CD300A Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CD300A (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CD300A para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CD300A definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.