Partículas Lentivirales de Activación (h) CD26: sc-400862-LAC

La DPP4 humana codifica CD26, una glucoproteína transmembrana de tipo II con actividad de dipeptidil peptidasa que trunca determinadas hormonas incretinas, quimiocinas y neuropéptidos, modulando la señalización mediada por péptidos en tejidos inmunitarios y metabólicos. Más allá de su función enzimática, CD26 participa en la señalización coestimuladora de los linfocitos T y modula las interacciones célula–célula y célula–matriz mediante socios de unión como la adenosina desaminasa y componentes de la matriz extracelular. DPP4/CD26 se integra en vías que regulan la inflamación, la quimiotaxis y la homeostasis de la glucosa, y su expresión se regula de forma dinámica en compartimentos epiteliales, endoteliales y hematopoyéticos. Se ha asociado una actividad alterada de DPP4 o cambios en la expresión de CD26 con la desregulación inmunitaria, rasgos cardiometabólicos y la biología tumoral, lo que respalda su uso como nodo mecanístico en estudios centrados en vías.

Las partículas de activación lentiviral CD26 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de DPP4 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral CD26 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción DPP4, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de CD26. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo DPP4 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.