CD206/Mannose Receptor/MMR CRISPR Activationプラスミド (m): sc-421707-ACT

Mrc1 は CD206（マンノース受容体、MMR）をコードしている。CD206 は C 型レクチンに属するスカベンジャー受容体で、マクロファージや樹状細胞に高発現し、病原体や内因性糖タンパク質に存在するマンノース、フコース、N-アセチルグルコサミンを含む糖鎖に結合する。CD206 は受容体介在性エンドサイトーシスおよび貪食を制御し、抗原の取り込みと処理を調節するとともに、自然免疫による監視や組織恒常性の維持に寄与する。また、代替活性化（M2様）マクロファージの極性化マーカーとしてしばしば用いられ、炎症の収束、細胞外マトリックスのリモデリング、線維化応答に関連する経路にも関与する。CD206 に関連したマクロファージのプログラムが破綻すると、慢性炎症性疾患、感染生物学、腫瘍微小環境免疫、代謝組織のリモデリングに関するマウスモデル研究でその関与が示唆されている。

CD206/Mannose Receptor/MMR CRISPR活性化プラスミド（m）は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性Mrc1の発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。

CD206/Mannose Receptor/MMR CRISPR 活性化プラスミド (m) は、ヒト細胞株における Mrc1 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異（D10AおよびN863A）を有する、触媒活性のないCas9（dCas9）を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。

標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はMrc1転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性CD206/Mannose Receptor/MMRの発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のMrc1遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるCD206/Mannose Receptor/MMR依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびMrc1発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるCD206/Mannose Receptor/MMR経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。