Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CD1D Double Nickase Plasmid (h): sc-402435-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das CD1D Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- CD1D Double-Nickase-Plasmid (h) und CD1D Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf CD1D abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: CD1D: sc-19632
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
CD1D Double Nickase Plasmid (h) | sc-402435-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD1D Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402435-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD1D kodiert CD1d, ein nichtklassisches, MHC‑Klasse‑I‑ähnliches, antigenpräsentierendes Molekül, das körpereigene und mikrobielle Lipidantigene bindet und sie an der Zelloberfläche zur Erkennung durch invariante natürliche Killer‑T‑Zellen (iNKT‑Zellen) präsentiert. Über CD1d–TCR‑Interaktionen koordiniert es die angeboren‑ähnliche T‑Zell‑Aktivierung, die rasche Zytokinfreisetzung und nachgeschaltete Wechselwirkungen mit dendritischen Zellen, NK‑Zellen und konventionellen T‑Zellen und prägt damit Immunüberwachung und Toleranz. Die CD1D‑Funktion ist in endosomalen Transport, Lipidbeladungswege und Antigenpräsentationsprozesse eingebettet, die entzündliche Signalwege und die immunologische Gewebehomöostase beeinflussen. Eine veränderte, CD1d‑vermittelte Präsentation von Lipidantigenen wird mit Immundysregulation in Zusammenhang gebracht, die für Infektionen, Tumorimmunologie sowie Autoimmun‑ oder Entzündungserkrankungen relevant ist, was mechanistische Studien in unterschiedlichen Zelltypen motiviert.
CD1D Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CD1D-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CD1D abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CD1D-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CD1D-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.