CD155 Double Nickaseプラスミド (m): sc-424585-NIC
- 対象生物種: mouse
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- CD155 Double Nickaseプラスミド (m)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- CD155ダブルニカースプラスミド（m）およびCD155ダブルニカースプラスミド（m2）は、Pvrを標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
CD155 Double Nickaseプラスミド (m) | sc-424585-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD155 Double Nickaseプラスミド (m2) | sc-424585-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
マウスのPvrはCD155（ポリオウイルス受容体／ネクチン様分子5）をコードしており、細胞間接着部位に局在し、細胞骨格の再編成、細胞移動、組織の構築に関与する免疫グロブリンスーパーファミリーの接着分子である。CD155はDNAM-1（CD226）、TIGIT、CD96を含む免疫受容体と結合し、接着と免疫監視の接点においてNK細胞およびT細胞のシグナル伝達を調節する。接着ダイナミクスと免疫チェックポイント様の相互作用における役割を通じて、Pvrは炎症、腫瘍免疫、ウイルス侵入機構といった文脈でしばしば研究されている。その発現および受容体結合特性は、マウスモデルにおいて細胞運動プログラムと免疫制御のクロストークを解析するための扱いやすい結節点を提供する。
CD155 ダブルニカースプラスミド（m）は、mouse 細胞株における Pvr 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、Pvr内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、Pvrの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、Pvrが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。