Plasmide Double Nickase (m) CD155: sc-424585-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) CD155 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CD155 Double Nickase (m) et le plasmide CD155 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Pvr. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) CD155 | sc-424585-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) CD155 | sc-424585-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Pvr** code **CD155** (récepteur du poliovirus / molécule 5 de type nectine), une molécule d’adhérence de la superfamille des immunoglobulines qui se localise aux contacts cellule–cellule et participe au remodelage du cytosquelette, à la migration et à l’organisation tissulaire. CD155 interagit avec des récepteurs immunitaires, notamment **DNAM-1 (CD226)**, **TIGIT** et **CD96**, modulant la signalisation des cellules NK et T à l’interface entre adhérence et surveillance immunitaire. En raison de ses rôles dans la dynamique d’adhérence et dans des interactions de type point de contrôle immunitaire, **Pvr** est fréquemment étudié dans les contextes de l’inflammation, de l’immunologie des tumeurs et des mécanismes d’entrée virale. Son expression et ses propriétés de liaison aux récepteurs constituent un point d’entrée pertinent pour analyser, dans des modèles murins, le dialogue entre les programmes de motilité cellulaire et la régulation immunitaire.
CD155 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Pvr dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Pvr. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Pvr. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Pvr.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.