CD137 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405068

概要

TNFRSF9は、活性化T細胞やその他の免疫細胞サブセットに発現するTNF受容体スーパーファミリーの誘導性共刺激受容体であるCD137（4-1BB）をコードします。CD137がリガンド結合などにより刺激されると、TRAFアダプターをリクルートしてNF-κBおよびMAPKシグナル伝達を活性化し、免疫応答の過程で細胞生存、増殖、サイトカイン産生、ならびに代謝リプログラミングを促進します。この経路は、細胞傷害性リンパ球の活性調節、樹状細胞機能、そして組織微小環境における炎症性シグナルの制御にも寄与します。TNFRSF9/CD137シグナルの破綻は、がん免疫、慢性感染、自己免疫疾患や炎症性疾患の研究領域で観察される免疫活性化状態の変化と関連づけられています。

CD137 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTNFRSF9遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TNFRSF9内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TNFRSF9のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CD137タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CD137シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TNFRSF9欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CD137の機能に不可欠なTNFRSF9エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TNFRSF9ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CD137 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCD137 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TNFRSF9遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CD137 HDRプラスミド（h）および CD137 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTNFRSF9ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTNFRSF9標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。