CCL14 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406423

概要

CCL14は分泌型のCCケモカインをコードしており、単球やリンパ球などの免疫細胞サブセット上にあるケモカイン受容体に結合することで白血球のトラフィッキング（移動・遊走）を協調的に制御し、組織内における炎症性濃度勾配の形成や免疫細胞の配置に影響を与えます。より広範なケモカインネットワークの一員として、CCL14は走化性、サイトカインシグナルの調節、ならびに内皮細胞の活性化や細胞外マトリックスのリモデリングを司る経路とのクロストークにも関与します。CCL14を含むケモカインシグナルの破綻は、慢性炎症状態や腫瘍関連炎症で観察される免疫浸潤パターンの変化と関連づけられており、ケモカインの合図の変動が免疫監視や間質との相互作用に影響し得ます。そのため、CCL14は免疫細胞遊走アッセイ、炎症性シグナルのプロファイリング、ケモカインネットワークのシステムレベルでのマッピングといった文脈で、しばしば研究対象となっています。

CCL14 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCCL14遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CCL14内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CCL14のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CCL14タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CCL14シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CCL14欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CCL14の機能に不可欠なCCL14エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CCL14ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CCL14 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCCL14 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CCL14遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CCL14 HDRプラスミド（h）および CCL14 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCCL14ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCCL14標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。