CCDC8 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406749

Descripción general

CCDC8 (coiled-coil domain containing 8) codifica una proteína citoplasmática de tipo *coiled-coil* implicada en la regulación de programas de crecimiento y supervivencia celular, con vínculos descritos con la señalización sensible al estrés y el control de la capacidad proliferativa. Estudios funcionales sugieren que CCDC8 puede influir en la apoptosis y en procesos relacionados con los puntos de control, conectándola con vías que modelan la homeostasis celular y la susceptibilidad a la transformación. La alteración de la expresión de CCDC8 o su disrupción se ha explorado en el contexto de la biología tumoral, donde los cambios en la regulación del crecimiento y en la señalización de supervivencia son características comunes. Estos atributos convierten a CCDC8 en un blanco útil para desentrañar mecanismos que acoplan funciones de proteínas del citoesqueleto o tipo andamiaje a la transducción de señales y a decisiones sobre el destino celular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO CCDC8 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CCDC8 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CCDC8 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CCDC8 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CCDC8.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CCDC8 para la investigación de la señalización de CCDC8, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de CCDC8 críticos para la función de CCDC8
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CCDC8 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido CCDC8 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CCDC8 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CCDC8. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CCDC8 (h) y el plásmido HDR CCDC8 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CCDC8 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CCDC8 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.