CCDC8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406749

概要

CCDC8（coiled-coil domain containing 8）は、細胞質に局在するコイルドコイルタンパク質をコードしており、細胞増殖や生存プログラムの制御に関与すると考えられています。ストレス応答性シグナル伝達や増殖能の制御との関連も報告されています。機能解析からは、CCDC8がアポトーシスやチェックポイント関連過程に影響し得ることが示唆されており、細胞恒常性や形質転換への感受性を左右する経路とのつながりが示されています。CCDC8の発現変化や機能破綻は、増殖制御や生存シグナルの変化が共通してみられる腫瘍生物学の文脈で検討されてきました。これらの特性によりCCDC8は、細胞骨格あるいは足場（スキャフォールド）様タンパク質の機能がシグナル伝達や細胞運命決定とどのように結び付くのかという機構を解析する上で有用な標的となります。

CCDC8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCCDC8遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CCDC8内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CCDC8のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CCDC8タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CCDC8シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CCDC8欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CCDC8の機能に不可欠なCCDC8エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CCDC8ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CCDC8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCCDC8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CCDC8遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CCDC8 HDRプラスミド（h）および CCDC8 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCCDC8ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCCDC8標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。