Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CBP20 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404124
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CBP20 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CBP20, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CBP20 Anticorpo (B-1): sc-137123
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CBP20 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404124 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
NCBP2 codifica a CBP20, a subunidade pequena do complexo nuclear de ligação ao cap (cap-binding complex), que reconhece o cap 7-metilguanosina em transcritos nascente da RNA polimerase II. Ao acoplar o reconhecimento do cap ao processamento de RNA, a CBP20 sustenta o splicing do pré-mRNA, a formação da extremidade 3′, a exportação nuclear e vias de vigilância de RNA, incluindo a degradação de mRNA mediada por códon de terminação prematuro (nonsense-mediated mRNA decay). Por meio dessas funções, a NCBP2 ajuda a coordenar programas de expressão gênica e a integridade do transcriptoma durante o crescimento celular e respostas ao estresse. A desregulação do metabolismo de RNA dependente de cap e do controle de qualidade de mRNA tem sido associada a estados transcricionais oncogênicos e a fenótipos do neurodesenvolvimento, tornando a NCBP2 um ponto útil para estudar mecanismos de processamento de RNA associados a doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CBP20 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NCBP2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NCBP2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NCBP2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CBP20.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NCBP2 para a investigação da sinalização de CBP20, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NCBP2 críticos para a função CBP20
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NCBP2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CBP20 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CBP20 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NCBP2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CBP20 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CBP20 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NCBP2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NCBP2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.