cathepsin F Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405658
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- cathepsin F O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico cathepsin F, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
cathepsin F Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405658 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CTSF codifica a catepsina F, uma protease cisteínica lisossomal da família da papaína que contribui para a renovação proteolítica de substratos intracelulares e endocitados. A catepsina F participa de vias de degradação mediadas por lisossomos, do fluxo autofagia–lisossomo e do processamento de antígenos, que moldam a homeostase celular e a sinalização imune. A perturbação da atividade de proteases lisossomais pode alterar o controle de qualidade de proteínas, a remodelação de organelas e o processamento da matriz extracelular por meio de efeitos a jusante no tráfego endo-lisossomal. CTSF tem sido estudado no contexto de fenótipos neurodegenerativos e inflamatórios, nos quais a disfunção lisossomal e a proteostase prejudicada são características mecanísticas centrais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO cathepsin F (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CTSF em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CTSF, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CTSF na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína cathepsin F.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CTSF para a investigação da sinalização de cathepsin F, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CTSF críticos para a função cathepsin F
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CTSF para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo cathepsin F Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo cathepsin F Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CTSF. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo cathepsin F Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR cathepsin F (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CTSF para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CTSF definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.