caspase-12 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419463

概要

マウスのCasp12はカスパーゼ12をコードしており、自然免疫シグナル伝達や、細胞ストレスおよび炎症反応に関連するプロテアーゼカスケードの調節に関与する炎症性カスパーゼです。カスパーゼ12は小胞体（ER）ストレス経路と関連づけられており、サイトカイン産生や抗菌防御を形作るシグナル伝達の要所に影響を及ぼし得ます。マウスモデルでは、Casp12の活性は宿主—病原体相互作用や、炎症に伴う組織損傷の文脈で研究されてきました。他のカスパーゼやストレス応答経路との機能的関係から、疾患モデルにおける炎症性表現型の基盤機構を解明するための研究対象として重要です。

caspase-12 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCasp12遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Casp12内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Casp12のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、caspase-12タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、caspase-12シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Casp12欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• caspase-12の機能に不可欠なCasp12エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Casp12ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• caspase-12 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびcaspase-12 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Casp12遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  caspase-12 HDRプラスミド（m）および caspase-12 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCasp12ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCasp12標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。