CARM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-425576

概要

Carm1 は、クロマチンのアクセス性と転写プログラムを制御するヒストン／非ヒストンタンパク質アルギニンメチルトランスフェラーゼである、coactivator-associated arginine methyltransferase 1（CARM1/PRMT4）をコードします。CARM1 はヒストン H3（例：H3R17/H3R26）や転写調節因子などの基質をメチル化し、RNA ポリメラーゼ II 依存的な遺伝子発現、選択的スプライシング、シグナル応答性の転写を協調的に制御します。マウス細胞において Carm1 は、核内受容体および増殖因子シグナル伝達、細胞運命決定、分化と増殖のエピジェネティック制御に関連する経路に影響を与えます。CARM1 活性の異常は、転写制御の破綻、発生異常、がん化シグナル伝達などの文脈で広く研究されており、エピジェネティックおよび転写ネットワークの機構解析における重要な標的となっています。

CARM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCarm1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Carm1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Carm1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CARM1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CARM1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Carm1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CARM1の機能に不可欠なCarm1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Carm1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CARM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCARM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Carm1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CARM1 HDRプラスミド（m）および CARM1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCarm1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCarm1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。