CARD 6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-413684

概要

CARD6（caspase recruitment domain family member 6）は、CARDドメインを含むヒトのアダプタータンパク質で、パターン認識受容体（PRR）シグナル伝達や炎症応答の調節に関与するとされています。CARDドメインを介したタンパク質間相互作用を通じて、CARD6は微生物の認識やストレス刺激の下流におけるNF-κBおよびMAPK経路の活性調節と関連づけられており、サイトカイン産生や自然免疫の活性化に影響を与えます。CARD6シグナルの変化は、炎症の制御異常や免疫関連の病態生理の文脈で議論されており、宿主防御および炎症シグナルネットワークの機序解明研究において重要な分子です。

CARD 6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCARD6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CARD6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CARD6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CARD 6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CARD 6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CARD6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CARD 6の機能に不可欠なCARD6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CARD6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CARD 6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCARD 6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CARD6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CARD 6 HDRプラスミド（h）および CARD 6 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCARD6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCARD6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。