Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) Calponin 1: sc-401397-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Calponin 1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Calponin 1 (h) y el plásmido de doble nickasa Calponin 1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CNN1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Calponin 1 Anticuerpo (CALP): sc-58707
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Calponin 1 | sc-401397-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Calponin 1 | sc-401397-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CNN1 codifica la calponina 1, una proteína que se une a la actina y a la calmodulina, enriquecida en el músculo liso diferenciado, donde estabiliza el citoesqueleto contráctil y modula la actividad ATPasa de la actomiosina. La calponina 1 contribuye a la organización de los filamentos de actina, a la dinámica de las adhesiones focales y a la regulación dependiente de calcio del tono del músculo liso, conectando la remodelación del citoesqueleto con la señalización contráctil. La alteración de la expresión de CNN1 se utiliza con frecuencia como indicador del cambio fenotípico de las células de músculo liso durante la remodelación vascular y en procesos asociados a la fibrosis. Estas propiedades hacen de CNN1 un nodo molecular útil para estudiar la regulación del citoesqueleto, la motilidad celular y la diferenciación del músculo liso en contextos cardiovasculares y de remodelación tisular.
Calponin 1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CNN1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CNN1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CNN1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CNN1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.