Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (h) CALML3: sc-400954-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CALML3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CALML3 Double Nickase (h) et le plasmide CALML3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CALML3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CALML3 | sc-400954-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CALML3 | sc-400954-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CALML3 (calmodulin-like 3) code une protéine à motif EF-hand liant le Ca2+ qui agit comme capteur calcique et modulateur des voies de signalisation dépendantes de la calmoduline. Il est enrichi dans les lignages épithéliaux et a été associé au remodelage du cytosquelette, à l’organisation des jonctions intercellulaires et à des réseaux de phosphorylation régulés par le calcium qui influencent la prolifération et la différenciation. L’activité de CALML3 recoupe des voies contrôlant la maturation des kératinocytes et l’homéostasie épithéliale via la régulation d’enzymes Ca2+-dépendantes et de complexes d’échafaudage. Une expression dérégulée a été rapportée dans de multiples pathologies épithéliales, y compris des cancers, ce qui fait de CALML3 une cible utile pour étudier comment la signalisation calcique reconfigure les programmes d’adhérence et de croissance.
CALML3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CALML3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CALML3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CALML3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CALML3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.