CALML3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400954

概要

CALML3は、EFハンド型のカルシウム結合タンパク質であるカルモジュリン様タンパク質3（calmodulin-like 3）をコードしており、状況依存的にカルモジュリン依存性シグナル伝達を調節するカルシウムセンサーとして機能します。CALML3は上皮組織で高発現しており、カルシウムによるキナーゼおよびホスファターゼ活性の制御を介して、細胞骨格の構築、膜動態、分化プログラムの制御に関与するとされています。細胞内Ca²⁺フラックスを下流エフェクターへ結び付けることで、CALML3は細胞接着、運動性、バリア機能に関連したリモデリングなどの過程に影響を及ぼし得ます。CALML3の発現パターンの変化は、上皮の病態生物学やがん関連表現型において報告されており、シグナル伝達の再配線や細胞状態遷移の研究対象としての重要性が示唆されています。

CALML3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCALML3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CALML3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CALML3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CALML3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CALML3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CALML3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CALML3の機能に不可欠なCALML3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CALML3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CALML3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCALML3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CALML3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CALML3 HDRプラスミド（h）および CALML3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCALML3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCALML3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。