Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Calgranulin B Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400801
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Calgranulin B El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Calgranulin B, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Calgranulin B Anticuerpo (B-5): sc-376772
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Calgranulin B Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400801 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
S100A9 codifica la calgranulina B, una proteína de la familia S100 de unión a calcio que forma heterodímeros con S100A8 y se expresa abundantemente en neutrófilos y monocitos inflamatorios. La calgranulina B regula la señalización de la inmunidad innata y el tráfico de leucocitos mediante interacciones con receptores de reconocimiento de patrones como TLR4 y RAGE, amplificando programas de citocinas y quimiocinas impulsados por NF-κB/MAPK. Contribuye a las respuestas antimicrobianas, a la regulación del estrés oxidativo y a la activación de células mieloides, y se estudia con frecuencia como marcador y mediador de la inflamación aguda y crónica. La expresión desregulada de S100A9 se ha asociado con trastornos inflamatorios y con programas mieloides vinculados al cáncer, incluida la captación y la polarización funcional de poblaciones mieloides supresoras en el microambiente tumoral.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Calgranulin B (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen S100A9 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del S100A9 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de S100A9 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Calgranulin B.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en S100A9 para la investigación de la señalización de Calgranulin B, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de S100A9 críticos para la función de Calgranulin B
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de S100A9 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Calgranulin B CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Calgranulin B CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus S100A9. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Calgranulin B (h) y el plásmido HDR Calgranulin B (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología S100A9 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana S100A9 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.