Plásmido CRISPR de Activación (m) cadherin-26: sc-436285-ACT

El gen murino **Cdh26** codifica la **cadherina-26**, una molécula de adhesión célula–célula dependiente de calcio dentro de la superfamilia de las cadherinas, que contribuye a la organización del tejido epitelial y al mantenimiento de la integridad de la barrera. Mediante interacciones asociadas a las uniones adherentes, la cadherina-26 favorece la polaridad celular, la señalización dependiente del contacto y la regulación coordinada de la dinámica del citoesqueleto que influye en la diferenciación y la remodelación epiteliales. Los patrones de expresión alterados de cadherinas se asocian con frecuencia a cambios en la adhesión, la migración y las respuestas inflamatorias del tejido, lo que convierte a **Cdh26** en una diana útil para estudiar la homeostasis epitelial y programas de remodelación dependientes del contexto. En sistemas murinos, la modulación de **Cdh26** puede ayudar a investigar cómo las redes de adhesión se intersectan con vías de señalización del desarrollo y asociadas al sistema inmunitario en tejidos de barrera.

cadherin-26 El plásmido de activación CRISPR (m) proporciona un enfoque específico y no destructivo para regular al alza la expresión endógena de Cdh26 sin alterar la secuencia de ADN subyacente.

cadherin-26 El plásmido de activación CRISPR (m) es un sistema mediador de activación sinérgica (SAM) de tres plásmidos diseñado para la regulación al alza transcripcional altamente eficiente y específica del locus Cdh26 en líneas celulares humanas. El sistema se basa en una Cas9 catalíticamente inactiva (dCas9) que porta dos mutaciones inactivadoras (D10A y N863A) que eliminan la actividad nucleasa al tiempo que conservan la unión al ADN. Esta dCas9 se fusiona con VP64, un potente activador transcripcional, y se coexpresa con un gen de resistencia a la blasticidina para la selección. El segundo plásmido codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1, un complejo activador secundario que actúa en conjunto con dCas9-VP64, junto con un gen de resistencia a la higromicina. El tercer plásmido codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 que reclutan el complejo MS2-p65-HSF1 al sitio de activación, acompañado de un gen de resistencia a la puromicina. Los tres plásmidos se administran en una proporción de masa de 1:1:1 para una expresión equilibrada de todos los componentes del sistema.

Una vez ensamblado en el locus diana, el complejo SAM se une aproximadamente 200 pb aguas arriba del sitio de inicio transcripcional Cdh26, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma coordinada para reclutar la maquinaria transcripcional e impulsar la regulación al alza de la expresión endógena de cadherin-26. A diferencia de la Cas9 con actividad nucleasa, dCas9 no introduce roturas de doble cadena ni modifica la secuencia genómica, preservando el locus nativo Cdh26 y permitiendo el estudio de las respuestas transcripcionales dependientes de cadherin-26 en el locus endógeno, lo que la convierte en una herramienta valiosa para estudios funcionales, la identificación de genes diana y la modelización de la restauración de la vía cadherin-26 en células tumorales con expresión de Cdh26 silenciada o reducida.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.