cadherin-24 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401990

概要

CDH24はカドヘリン24をコードしており、カドヘリン24はカルシウム依存的な細胞間接着タンパク質として、接着結合（アドヘレンスジャンクション）の完全性と接触依存的シグナル伝達を支えることで上皮組織の構築に寄与します。カドヘリンを介したカテニンおよびアクチン細胞骨格との相互作用により、カドヘリン24は細胞極性、バリア機能、協調的な細胞移動といった過程に影響を与えます。カドヘリンの発現パターンが破綻すると、細胞間の結束性や、上皮のリモデリングや浸潤関連表現型に結びつくシグナル伝達ネットワークが変化し得ます。そのためCDH24は、接着依存的な組織構造の制御や、疾患に関連する細胞挙動の変化を研究するうえで注目されています。

cadherin-24 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCDH24遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CDH24内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CDH24のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、cadherin-24タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、cadherin-24シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CDH24欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• cadherin-24の機能に不可欠なCDH24エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CDH24ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• cadherin-24 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびcadherin-24 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CDH24遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  cadherin-24 HDRプラスミド（h）および cadherin-24 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCDH24ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCDH24標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。