Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
cadherin-19 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-401716
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- cadherin-19 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico cadherin-19, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: cadherin-19 Antibody (D-1): sc-376990
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
cadherin-19 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-401716 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
CDH19 codifica la caderina-19, una molecola di adesione cellula-cellula dipendente dal calcio che contribuisce all’architettura dei tessuti e alla segnalazione mediata dal contatto. In quanto membro della famiglia delle caderine classiche, la caderina-19 favorisce l’organizzazione delle giunzioni aderenti tramite interazioni con le catenine e il collegamento al citoscheletro di actina, influenzando processi quali polarità cellulare, migrazione e differenziamento. L’espressione di CDH19 è stata riportata in lineaggi neuronali e gliali, in cui l’adesione mediata dalle caderine può modellare il patterning dello sviluppo e le interazioni cellulari. Un’espressione deregolata delle caderine e il rimodellamento delle giunzioni sono spesso associati a un’invasività alterata e a cambiamenti dell’identità di linea in contesti patologici, rendendo CDH19 un bersaglio utile per lo studio di fenotipi dipendenti dall’adesione.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO cadherin-19 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene CDH19 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del CDH19 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto CDH19 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina cadherin-19.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di CDH19 per lo studio della segnalazione di cadherin-19, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni CDH19 critici per la funzione di cadherin-19
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di CDH19 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal cadherin-19 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal cadherin-19 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus CDH19. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal cadherin-19 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR cadherin-19 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia CDH19 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio CDH19 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.