Plasmide Double Nickase (h) cadherin-16: sc-401598-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) cadherin-16 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide cadherin-16 Double Nickase (h) et le plasmide cadherin-16 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CDH16. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: cadherin-16 Antibody (H-10): sc-393132
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) cadherin-16 | sc-401598-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) cadherin-16 | sc-401598-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDH16 code la cadhérine‑16, une molécule d’adhérence cellule‑cellule dépendante du calcium, enrichie dans l’épithélium tubulaire rénal, qui contribue au maintien de la polarité épithéliale et de l’architecture tissulaire. Par l’adhésion homophile et son couplage aux caténines, la cadhérine‑16 influence l’assemblage des jonctions d’adhérence, l’organisation du cytosquelette et des processus de signalisation liés à la différenciation épithéliale et à la fonction de barrière. Une expression altérée de CDH16 est associée à une perturbation de l’intégrité des tubules et a été rapportée dans la physiopathologie rénale ainsi que dans la biologie des tumeurs du rein, ce qui soutient son utilité comme marqueur et comme nœud fonctionnel dans la régulation de l’état épithélial. L’étude de la cadhérine‑16 apporte des informations sur le remodelage jonctionnel, la plasticité épithéliale et les changements dépendants du contexte des programmes d’adhérence cellulaire.
cadherin-16 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CDH16 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CDH16. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CDH16. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CDH16.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.