Cacna2d2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-425312

概要

Cacna2d2は、電位依存性カルシウムチャネルの補助サブユニットであるα2δ-2をコードしており、チャネルの輸送、膜上発現、ならびに神経興奮性やシナプス伝達時のカルシウム流入を規定する生物物理学的特性を形作るうえで重要な制御因子です。CaVチャネル機能を調節することで、CACNA2D2は活動依存的シグナル伝達、神経伝達物質放出、回路形成や可塑性に影響するカルシウム依存的な遺伝子発現プログラムに関与します。α2δサブユニットの遺伝学的・機能的変化は神経発達および神経学的表現型と関連づけられており、とくにCacna2d2は小脳機能や運動協調に関わる経路との関連が示されています。これらの特徴により、Cacna2d2は神経生物学および電気生理学に焦点を当てた疾患モデルにおいて、カルシウムチャネル補助機構を解明するための有用な標的となります。

Cacna2d2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCacna2d2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Cacna2d2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Cacna2d2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Cacna2d2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Cacna2d2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Cacna2d2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Cacna2d2の機能に不可欠なCacna2d2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Cacna2d2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Cacna2d2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCacna2d2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Cacna2d2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Cacna2d2 HDRプラスミド（m）および Cacna2d2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCacna2d2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCacna2d2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。