Plásmido Doble Nickase (h) C4BPα: sc-404684-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)C4BPα consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa C4BPα (h) y el plásmido de doble nickasa C4BPα (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a C4BPA. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: C4BPα Anticuerpo (D-5): sc-398720
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) C4BPα | sc-404684-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) C4BPα | sc-404684-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
C4BPA codifica la cadena alfa de la proteína de unión a C4b (C4BPα), un regulador soluble de las vías clásica y de las lectinas del complemento que se une a C4b y acelera la descomposición de las convertasas de C3 para limitar la amplificación del complemento. Al actuar como cofactor para la escisión de C4b mediada por el factor I, C4BPα ayuda a mantener la homeostasis inmunitaria y protege las superficies del huésped de una inflamación excesiva mediada por el complemento. C4BPα también participa en la depuración de complejos inmunes y material apoptótico, y puede influir en respuestas dependientes de la opsonización en la interfaz entre la inmunidad innata y la adaptativa. La actividad desregulada de C4BPA/C4BPα se ha relacionado con el desequilibrio del complemento observado en trastornos autoinmunes e inflamatorios y con mecanismos de evasión inmunitaria asociados a tumores estudiados en múltiples contextos oncológicos.
C4BPα El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus C4BPA en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de C4BPA. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de C4BPA. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con C4BPA alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.