Plasmide Double Nickase (h) C4a: sc-402428-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) C4a correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide C4a Double Nickase (h) et le plasmide C4a Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant C4A. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) C4a | sc-402428-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) C4a | sc-402428-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le composant 4A du complément (C4A) code C4a, un fragment protéolytique généré lors de l’activation des voies classique et des lectines du complément. C4a est libéré lors du clivage de C4 et contribue à la signalisation de l’immunité innée en modulant les réponses inflammatoires locales, en coordination avec les mécanismes effecteurs du complément en aval, notamment la formation de la C3 convertase et les cascades d’opsonisation. Des variations du nombre de copies du gène C4A et de l’activité du complément ont été associées à une dérégulation immunitaire, incluant l’auto-immunité et des processus neuro-inflammatoires, faisant de C4A un locus clé pour les études mécanistiques. Dans des modèles cellulaires, la perturbation de C4A aide à définir comment la signalisation médiée par le complément s’articule avec la gestion des antigènes, les réseaux de cytokines et l’homéostasie tissulaire.
C4a Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus C4A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de C4A. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de C4A. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de C4A.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.