C22orf25 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-414343

概要

TANGO2（C22orf25）は、細胞のエネルギー恒常性に関与するとされる保存性の高いタンパク質をコードしており、ミトコンドリア機能およびER–ゴルジ体間輸送を、より広い代謝の協調制御へと結び付ける役割が報告されています。TANGO2活性の喪失は、酸化的代謝の破綻や細胞ストレス応答の乱れと関連しており、ミトコンドリア動態の変化や異化（カタボリック）需要に対する感受性の増大といった観察結果とも整合します。ヒトの生物学においてTANGO2は、エネルギー処理の障害が高需要組織に影響する神経代謝系の表現型との関連で研究されることが最も多い分子です。そのためTANGO2は、細胞内輸送、ミトコンドリア生理、そしてストレス適応経路をつなぐ機構を解明するうえで有用な標的となります。

C22orf25 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTANGO2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TANGO2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TANGO2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、C22orf25タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、C22orf25シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TANGO2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• C22orf25の機能に不可欠なTANGO2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TANGO2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• C22orf25 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびC22orf25 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TANGO2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  C22orf25 HDRプラスミド（h）および C22orf25 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTANGO2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTANGO2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。