Plásmido Doble Nickase (h) C1r: sc-405842-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)C1r consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa C1r (h) y el plásmido de doble nickasa C1r (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a C1R. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: C1r Anticuerpo (F-7): sc-514105
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) C1r | sc-405842-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) C1r | sc-405842-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
C1R codifica el componente del complemento C1r, una proteasa de serina que forma el complejo C1 junto con C1q y C1s para iniciar la cascada clásica del complemento. Tras su activación, C1r escinde y activa C1s, impulsando la escisión posterior de C4 y C2 y promoviendo la opsonización y la señalización inflamatoria. La función de C1r conecta la vigilancia inmunitaria innata con la eliminación de complejos inmunes y la modulación de redes de citocinas. La actividad desregulada de C1R y el desequilibrio de la vía clásica se han asociado con fenotipos inflamatorios mediados por el complemento y con daño tisular relacionado con complejos inmunes, lo que respalda su uso como diana mecanística en investigación inmunológica.
C1r El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus C1R en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de C1R. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de C1R. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con C1R alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.