Plasmide Double Nickase (h) C1QBP: sc-400911-NIC

C1QBP (protéine de liaison au composant 1q du complément ; également connue sous le nom de p32/gC1qR) est une protéine humaine multifonctionnelle, localisée principalement dans les mitochondries, qui participe à la régulation de la phosphorylation oxydative, au fonctionnement du ribosome mitochondrial et au métabolisme énergétique cellulaire. Elle interagit aussi avec des composants du système du complément et peut moduler, selon le contexte, la signalisation inflammatoire et des processus de l’immunité innée. Par ses rôles dans l’homéostasie mitochondriale et la gestion de l’ARN/des protéines, C1QBP contribue au contrôle de l’apoptose, des réponses au stress et des programmes de prolifération. Une expression ou une localisation altérées de C1QBP ont été associées à un métabolisme dérégulé et à des phénotypes inflammatoires rapportés dans de multiples contextes pathologiques, ce qui étaye son intérêt en tant que cible mécanistique pour la recherche en immunométabolisme et en biologie mitochondriale.

C1QBP Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus C1QBP dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de C1QBP. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de C1QBP. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de C1QBP.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.