Plásmido Doble Nickase (h) C1q-B: sc-404309-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)C1q-B consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa C1q-B (h) y el plásmido de doble nickasa C1q-B (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a C1QB. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) C1q-B | sc-404309-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) C1q-B | sc-404309-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
C1QB codifica la cadena B del componente del complemento C1q, una molécula de reconocimiento clave que inicia la vía clásica del complemento al unirse a complejos inmunes y a estructuras propias alteradas. C1q contribuye a la opsonización, a la modulación de la eliminación por macrófagos y microglía, y a la señalización de citocinas que moldea las respuestas inmunitarias innatas y adaptativas. Mediante la activación del complemento y la interacción con vías de receptores Fc, C1q influye en la inflamación, la poda sináptica y la eliminación de desechos extracelulares. La expresión o actividad desregulada de C1q/C1QB se ha asociado con fenotipos inflamatorios y autoinmunes, respuestas inmunitarias relacionadas con infecciones y procesos neuroinflamatorios relevantes para la investigación en neurodegeneración.
C1q-B El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus C1QB en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de C1QB. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de C1QB. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con C1QB alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.