Plasmide Double Nickase (m) C/EBP δ: sc-419624-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) C/EBP δ correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide C/EBP δ Double Nickase (m) et le plasmide C/EBP δ Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Cebpd. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: C/EBP δ Antibody (D-1): sc-515028
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) C/EBP δ | sc-419624-NIC | 20 µg | $410.00 |
Cebpd code C/EBPδ, un facteur de transcription de type « basic leucine zipper » qui module des programmes d’expression génique inductibles contrôlant l’inflammation, la différenciation et les réponses au stress cellulaire dans les tissus murins. C/EBPδ intègre les signaux en aval des cytokines et des voies des récepteurs Toll-like, orientant des réponses transcriptionnelles qui influencent l’activation myéloïde, l’adipogenèse et le remodelage tissulaire. Son activité recoupe des réseaux associés aux voies MAPK et NF-κB et contribue à la régulation de l’arrêt du cycle cellulaire et de la survie en situation de stress. Une expression dérégulée de C/EBPδ a été associée à des physiopathologies inflammatoires ainsi qu’à des rôles dépendants du contexte en biologie des cancers, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques du contrôle transcriptionnel dans des modèles de maladie.
C/EBP δ Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Cebpd dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Cebpd. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Cebpd. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Cebpd.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.