Plasmide Double Nickase (h) C/EBP beta: sc-400125-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) C/EBP beta correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide C/EBP beta Double Nickase (h) et le plasmide C/EBP beta Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CEBPB. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: C/EBP beta Antibody (H-7): sc-7962
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) C/EBP beta | sc-400125-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) C/EBP beta | sc-400125-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CEBPB code C/EBP bêta, un facteur de transcription à fermeture éclair à leucines (bZIP) qui régule la détermination de lignée et l’expression de gènes sensibles au stress dans les cellules hématopoïétiques et mésenchymateuses. Il intègre les signaux des cytokines et des facteurs de croissance en aval de voies telles que JAK/STAT, MAPK et NF-κB afin de contrôler des programmes liés à l’inflammation, aux réponses de phase aiguë, à l’adipogenèse et à l’activation des macrophages. C/EBP bêta coordonne également les décisions de cycle cellulaire et de survie via des réseaux transcriptionnels dépendants du contexte, notamment en coopération avec AP-1 et d’autres membres de la famille C/EBP. Une activité dérégulée de CEBPB a été associée à une signalisation inflammatoire aberrante, à des états de différenciation altérés et à des phénotypes transcriptionnels pro-tumoraux dans plusieurs modèles pertinents en oncologie.
C/EBP beta Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CEBPB dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CEBPB. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CEBPB. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CEBPB.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.