BTG3 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-407253

Panoramica

BTG3 (B-cell translocation gene 3) codifica una proteina antiproliferativa della famiglia BTG/TOB che contribuisce a coordinare il controllo del ciclo cellulare e la differenziazione cellulare. BTG3 funge da coregolatore trascrizionale e interagisce con vie che regolano la transizione G1/S, le risposte al danno al DNA e la segnalazione apoptotica, collegando la sua attività al mantenimento della stabilità genomica. Un’espressione alterata di BTG3 è stata riportata in molteplici contesti tumorali ed è comunemente associata a proliferazione disregolata, segnalazione della risposta allo stress e cambiamenti nello stato di differenziazione, rendendolo un nodo utile per studi meccanicistici sul controllo della crescita.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO BTG3 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene BTG3 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del BTG3 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto BTG3 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina BTG3.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di BTG3 per lo studio della segnalazione di BTG3, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni BTG3 critici per la funzione di BTG3
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di BTG3 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal BTG3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal BTG3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus BTG3. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal BTG3 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR BTG3 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia BTG3 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio BTG3 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.