Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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brevican Double Nickase Plasmid (h): sc-402668-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das brevican Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- brevican Double-Nickase-Plasmid (h) und brevican Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf BCAN abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: brevican: sc-135849
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
brevican Double Nickase Plasmid (h) | sc-402668-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
brevican Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402668-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BCAN kodiert Brevican, ein im Gehirn stark angereichertes Chondroitinsulfat-Proteoglykan, das ein wichtiger Bestandteil der extrazellulären Matrix und der perineuronalen Netze ist. Brevican trägt zur neuronalen Entwicklung und zur Stabilisierung von Synapsen bei, indem es Zell–Matrix-Interaktionen, das Neuritenauswachsen und die extrazellulären Diffusionseigenschaften im ZNS moduliert. Durch Wechselwirkungen mit Hyaluronan-bindenden Partnern und anderen Matrixbestandteilen beeinflusst es die Organisation der extrazellulären Matrix, die neuronale Plastizität sowie Gewebeumbauprozesse. Eine veränderte BCAN-Expression und Brevican-Prozessierung wurde mit neuroentwicklungsbedingten und neurodegenerativen Phänotypen in Verbindung gebracht und im Kontext von ZNS-Verletzungen sowie gliomassoziiertem Remodeling der extrazellulären Matrix untersucht.
brevican Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des BCAN-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von BCAN abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die BCAN-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit BCAN-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.