Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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BRD4 Plasmide Double Nickase (h): sc-400519-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- BRD4 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il BRD4 Double Nickase Plasmid (h) e il BRD4 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira BRD4. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: BRD4 Antibody (A-7): sc-518021
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
BRD4 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400519-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BRD4 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400519-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BRD4 (bromodomain-containing 4) è un "lettore" della cromatina della famiglia BET che riconosce le lisine acetilate sulle code degli istoni per regolare l'allungamento trascrizionale e l'attività degli enhancer. Coordina il reclutamento di P-TEFb e della RNA polimerasi II, collegando lo stato della cromatina all'espressione di geni che controllano la progressione del ciclo cellulare, le risposte al danno al DNA e la segnalazione infiammatoria. BRD4 agisce in modo prominente sui super-enhancer e modula programmi come la trascrizione guidata da MYC, rendendolo un nodo chiave della regolazione epigenetica. Un'attività di BRD4 deregolata e paesaggi degli enhancer alterati sono associati a fenotipi proliferativi e infiammatori e sono stati studiati in molteplici contesti rilevanti per il cancro e per l'immunità.
BRD4 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus BRD4 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di BRD4. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di BRD4. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con BRD4 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.