BRD1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406252

概要

ヒトBRD1（bromodomain containing 1）はクロマチン関連の制御因子であり、ブロモドメインを介してヒストンテール上のアセチル化リジン残基を認識し、ヒストンのアセチル化を転写制御へと結び付けます。BRD1は、クロマチンリモデリングや共制御因子のリクルートを通じてプロモーターおよびエンハンサー活性を調節するなど、発生や細胞分化の過程で遺伝子発現を形作るエピジェネティックプログラムに関与します。神経系および免疫関連経路に結び付いた転写ネットワークを調節することから、BRD1は神経精神疾患をはじめとする複雑で多遺伝子性の疾患に関連する遺伝子発現状態の変化という観点で研究されてきました。ヒストンアセチル化と転写の接点に位置するという役割により、BRD1は細胞同一性やストレス応答に影響するクロマチン依存的機構を解明するための有用な標的となります。

BRD1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるBRD1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、BRD1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、BRD1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、BRD1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、BRD1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、BRD1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• BRD1の機能に不可欠なBRD1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、BRD1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• BRD1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびBRD1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、BRD1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  BRD1 HDRプラスミド（h）および BRD1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはBRD1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のBRD1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。