Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
BRD1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406252
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- BRD1 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico BRD1, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: BRD1 Antibody (F-12): sc-398226
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
BRD1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-406252 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
BRD1 umano (bromodomain containing 1) è un regolatore associato alla cromatina che riconosce residui di lisina acetilata sulle code istoniche tramite il suo bromodominio, collegando l’acetilazione degli istoni al controllo trascrizionale. BRD1 partecipa a programmi epigenetici che modellano l’espressione genica durante lo sviluppo e la differenziazione cellulare, inclusa la regolazione dell’attività di promotori ed enhancer attraverso il rimodellamento della cromatina e il reclutamento di co-regolatori. Modulando reti trascrizionali connesse a vie neuronali e immunitarie, BRD1 è stato studiato nel contesto di stati di espressione genica alterati rilevanti per disturbi neuropsichiatrici e altre patologie complesse e poligeniche. Il suo ruolo all’interfaccia tra acetilazione degli istoni e trascrizione rende BRD1 un bersaglio utile per analizzare i meccanismi dipendenti dalla cromatina che influenzano l’identità cellulare e le risposte allo stress.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO BRD1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene BRD1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del BRD1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto BRD1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina BRD1.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di BRD1 per lo studio della segnalazione di BRD1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni BRD1 critici per la funzione di BRD1
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di BRD1 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal BRD1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal BRD1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus BRD1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal BRD1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR BRD1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia BRD1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio BRD1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.