bradykinin B2 R Lentiviral Activation Particles (m): sc-419318-LAC

Das Mausgen **Bdkrb2** kodiert den Bradykinin‑B2‑Rezeptor (Bradykinin B2 R), einen konstitutiv exprimierten G‑Protein‑gekoppelten Rezeptor, der Bradykinin und verwandte Kinine bindet und so den Gefäßtonus, die Endothelpermeabilität und die nozizeptive Signalübertragung reguliert. Nach Ligandenbindung koppelt B2R überwiegend an die Gq/11‑ und Gi‑Signalwege und stimuliert dadurch eine PLCβ‑abhängige Calciummobilisierung, die Bildung von Stickstoffmonoxid und Prostaglandinen sowie nachgeschaltete MAPK/ERK‑Signalgebung, die Entzündungs‑ und Stressantworten mitprägt. Die Bdkrb2‑Aktivität greift in die Dynamik des Kallikrein‑Kinin‑Systems ein und steht im Crosstalk mit der Renin‑Angiotensin‑Signalgebung, wodurch sie die hämodynamische Homöostase und das Gewebe‑Remodeling beeinflusst. Eine fehlregulierte B2R‑Signalübertragung wurde in experimentellen Modellen mit Entzündung, Schmerzüberempfindlichkeit, Ödemen sowie kardiovaskulärer und renaler Pathophysiologie in Verbindung gebracht, was sie zu einem nützlichen Ziel für mechanistische Studien in diesen Kontexten macht.

bradykinin B2 R Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Bdkrb2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

bradykinin B2 R Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Bdkrb2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen bradykinin B2 R-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Bdkrb2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.