Plasmide Double Nickase (h) BR-cadherin: sc-401987-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) BR-cadherin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide BR-cadherin Double Nickase (h) et le plasmide BR-cadherin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CDH12. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) BR-cadherin | sc-401987-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) BR-cadherin | sc-401987-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDH12 code pour la BR‑cadherine, une molécule d’adhérence calcium‑dépendante entre cellules appartenant à la famille des cadherines classiques, qui contribue à l’architecture des tissus grâce à des interactions homophiles et à son couplage aux caténines. En reliant les jonctions d’adhérence au cytosquelette d’actine, la BR‑cadherine influence la signalisation dépendante du contact, la polarité cellulaire et la migration coordonnée au cours du développement et du remodelage tissulaire. L’expression de CDH12 a été associée à l’organisation des tissus neuraux et épithéliaux, et la dérégulation de l’adhérence médiée par les cadherines est largement impliquée dans les comportements invasifs et des programmes de différenciation altérés en pathologie. En tant que régulateur jonctionnel, la BR‑cadherine constitue un point d’entrée accessible pour étudier comment l’état d’adhérence reconfigure la signalisation intracellulaire et les processus morphogénétiques.
BR-cadherin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CDH12 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CDH12. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CDH12. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CDH12.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.