BMPR-IA CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h2): sc-400581-KO-2

概要

BMPR1A は、骨形成タンパク質（BMP）受容体タイプ IA（BMPR-IA）をコードしており、BMP リガンドに結合するセリン／スレオニンキナーゼ型受容体です。BMPR-IA は、カノニカルな SMAD1/5/9 シグナル伝達に加えて、非カノニカルな MAPK 経路も開始します。これらのカスケードを介して、BMPR-IA は細胞運命の決定、増殖、分化、組織形態形成を制御し、とくに骨形成プログラムや上皮の恒常性維持において重要な役割を担います。BMPR1A シグナルの変化は、BMP/TGF-β 経路活性の異常を通じて、発生異常やがん関連の過程（幹細胞動態や増殖制御への影響を含む）に関与するとされています。そのため BMPR1A は、系譜コミットメント、オルガノイド生物学、シグナル伝達のクロストークなどの文脈で広く研究されています。

BMPR-IA CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）は、human細胞株におけるBMPR1A遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、BMPR1A内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、BMPR1Aのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、BMPR-IAタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、BMPR-IAシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、BMPR1A欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• BMPR-IAの機能に不可欠なBMPR1Aエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、BMPR1Aゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• BMPR-IA CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびBMPR-IA CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、BMPR1A遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  BMPR-IA HDRプラスミド（h）および BMPR-IA HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはBMPR1Aホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のBMPR1A標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。