BMP-8A Lentiviral Activation Particles (h): sc-406589-LAC

BMP8A kodiert das knochenmorphogenetische Protein 8A (BMP-8A), einen sezernierten Liganden der TGF-β-Superfamilie, der über BMP-Rezeptoren vom Typ I/II signalisiert und SMAD1/5/9-abhängige Transkriptionsprogramme aktiviert. BMP-8A trägt zur Musterbildung während der Entwicklung und zur Gewebehomöostase bei, indem es Zellschicksalsentscheidungen, Differenzierung und morphogenetische Prozesse reguliert; nachgeschaltete Crosstalk-Interaktionen mit MAPK-Signalwegen können dabei kontextspezifische Antworten weiter verfeinern. Eine veränderte Aktivität des BMP-Signalwegs – einschließlich einer dysregulierten Ligandenverfügbarkeit oder einer gestörten Rezeptor-SMAD-Signalübertragung – wird breit mit Defekten der Organogenese sowie mit krankheitsrelevanten Veränderungen in Proliferation, Differenzierung und Umbau der extrazellulären Matrix in Verbindung gebracht. Als humaner BMP-Ligand ist BMP-8A daher ein nützlicher Knotenpunkt, um die Dynamik der BMP/TGF-β-Signalübertragung in der Stammzellbiologie und in Entwicklungsmodellen zu untersuchen.

BMP-8A Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente BMP8A-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

BMP-8A Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der BMP8A-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen BMP-8A-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen BMP8A-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.