BMP-8A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406589

Visão geral

BMP8A codifica a proteína morfogenética óssea 8A (BMP-8A), um ligante secretado da superfamília TGF-β que sinaliza por meio de receptores de BMP para ativar programas transcricionais dependentes de SMAD1/5/9. A BMP-8A contribui para a regulação do padrão de desenvolvimento, da diferenciação e do remodelamento tecidual, e pode influenciar processos celulares como proliferação, comprometimento de linhagem e dinâmica da matriz extracelular. Como parte da rede mais ampla de sinalização de BMP, o BMP8A interage com vias que governam a morfogênese e a organogênese e pode modular o crosstalk com MAPK e outras cascatas de sinalização específicas do contexto. A atividade desregulada da via de BMP, incluindo alterações na disponibilidade de ligantes, está associada a fenótipos de desenvolvimento aberrantes e tem sido estudada em contextos relevantes de doença envolvendo fibrose, biologia esquelética e sinalização no microambiente tumoral.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO BMP-8A (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene BMP8A em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do BMP8A, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do BMP8A na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína BMP-8A.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de BMP8A para a investigação da sinalização de BMP-8A, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) BMP8A críticos para a função BMP-8A
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos BMP8A para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo BMP-8A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo BMP-8A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus BMP8A. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo BMP-8A Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR BMP-8A (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia BMP8A para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo BMP8A definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.