BMP-8A Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406589

Descripción general

BMP8A codifica la proteína morfogenética ósea 8A (BMP-8A), un ligando secretado de la superfamilia TGF-β que señaliza a través de receptores BMP para activar programas de transcripción dependientes de SMAD1/5/9. BMP-8A contribuye a la regulación del patrón del desarrollo, la diferenciación y la remodelación tisular, y puede influir en procesos celulares como la proliferación, la determinación de linaje y la dinámica de la matriz extracelular. Como parte de la red más amplia de señalización BMP, BMP8A se cruza con vías que gobiernan la morfogénesis y la organogénesis y puede modular la comunicación cruzada con MAPK y otras cascadas de señalización específicas del contexto. La actividad desregulada de la vía BMP, incluida la alteración de la disponibilidad de ligandos, se asocia con fenotipos de desarrollo anómalos y se ha estudiado en contextos relevantes para enfermedades que implican fibrosis, biología esquelética y señalización del microambiente tumoral.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO BMP-8A (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen BMP8A en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del BMP8A junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de BMP8A tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína BMP-8A.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en BMP8A para la investigación de la señalización de BMP-8A, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de BMP8A críticos para la función de BMP-8A
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de BMP8A para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido BMP-8A CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido BMP-8A CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus BMP8A. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR BMP-8A (h) y el plásmido HDR BMP-8A (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología BMP8A para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana BMP8A definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.