BMP-8A CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406589

概要

BMP8Aは、TGF-βスーパーファミリーに属する分泌性リガンドである骨形成タンパク質8A（BMP-8A）をコードしています。BMP-8AはBMP受容体を介してシグナルを伝達し、SMAD1/5/9依存的な転写プログラムを活性化します。BMP-8Aは発生パターン形成、組織分化、リモデリングの制御に寄与し、増殖、系譜決定、細胞外マトリックス動態などの細胞プロセスに影響を与え得ます。より広範なBMPシグナル伝達ネットワークの一部として、BMP8Aは形態形成および器官形成を司る経路と交差し、MAPKなど状況依存的なシグナル伝達カスケードとのクロストークを調節する可能性があります。リガンドの利用可能性の変化を含むBMP経路活性の破綻は、異常な発生表現型と関連し、線維化、骨格生物学、腫瘍微小環境におけるシグナル伝達など、疾患関連の文脈で研究されています。

BMP-8A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるBMP8A遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、BMP8A内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、BMP8Aのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、BMP-8Aタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、BMP-8Aシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、BMP8A欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• BMP-8Aの機能に不可欠なBMP8Aエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、BMP8Aゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• BMP-8A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびBMP-8A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、BMP8A遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  BMP-8A HDRプラスミド（h）および BMP-8A HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはBMP8Aホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のBMP8A標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。