Plasmide Double Nickase (h) BMP-5: sc-404234-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) BMP-5 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide BMP-5 Double Nickase (h) et le plasmide BMP-5 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant BMP5. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: BMP-5 Antibody (MM0117-9G27): sc-517459
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) BMP-5 | sc-404234-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) BMP-5 | sc-404234-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BMP5 code pour la protéine morphogénétique osseuse 5 (BMP‑5), un ligand sécrété de la superfamille TGF‑β qui transmet ses signaux via les récepteurs BMP de type I/II à activité sérine/thréonine kinase, afin d’activer des programmes transcriptionnels dépendants de SMAD1/5/8. BMP‑5 contribue à la mise en place des patrons embryonnaires, à la différenciation ostéochondrale et à l’homéostasie de la matrice extracellulaire, en coordonnant des interactions avec la voie MAPK et d’autres nœuds de signalisation dépendants du contexte. Une altération de la signalisation BMP5 a été associée à un développement anormal du squelette et des articulations ainsi qu’à une dérégulation du remodelage tissulaire, soulignant sa pertinence pour les études sur la biologie du cartilage, la formation osseuse et les voies du développement. L’activité de BMP‑5 s’intègre également à des gradients morphogéniques plus larges qui influencent l’engagement de lignée et l’architecture tissulaire.
BMP-5 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus BMP5 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de BMP5. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de BMP5. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de BMP5.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.