BLM CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419336

概要

Blm は、マウスの BLM（RecQ ファミリー）DNA ヘリカーゼをコードしており、異常な相同組換えを抑制し、停止した複製フォークの解消を助けるなど、ゲノム維持における中心的因子です。BLM はトポイソメラーゼ IIIα、RMI1/2、その他の修復タンパク質と協調して組換え中間体を処理し、DNA 二本鎖切断の正確な修復を促進するとともに、S 期の進行を支えます。複製ストレス応答、テロメア安定性、チェックポイントシグナル伝達における役割を通じて、BLM は変異の蓄積や染色体再編成に影響します。BLM 活性の制御異常はゲノム不安定性の亢進と関連しており、がん生物学、DNA 損傷シグナル、加齢に伴うゲノム維持の研究に広く重要です。

BLM CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるBlm遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Blm内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Blmのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、BLMタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、BLMシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Blm欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• BLMの機能に不可欠なBlmエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Blmゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• BLM CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびBLM CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Blm遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  BLM HDRプラスミド（m）および BLM HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはBlmホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のBlm標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。