BICD2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405525

概要

BICD2（bicaudal D homolog 2）は、貨物を微小管に沿ったマイナス端方向輸送へ結び付けるダイニン–ダイナクチンアダプターをコードしており、神経細胞のような極性をもつ細胞における長距離輸送を支えます。BICD2は小胞、エンドソーム、細胞小器官を細胞質ダイニンに連結することで、ゴルジ体の構造維持、エンドソームの配置、核膜のダイナミクス、ならびに紡錘体の配向を含む細胞周期関連過程に寄与します。BICD2依存的な輸送は、軸索の恒常性や膜輸送を制御する経路とも交差しており、神経細胞の維持に必要な精密な貨物配送に関与します。BICD2の遺伝的変異は神経筋系の表現型と関連づけられており、運動ニューロンの生物学や細胞内輸送障害の研究における重要な標的となっています。

BICD2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるBICD2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、BICD2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、BICD2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、BICD2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、BICD2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、BICD2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• BICD2の機能に不可欠なBICD2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、BICD2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• BICD2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびBICD2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、BICD2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  BICD2 HDRプラスミド（h）および BICD2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはBICD2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のBICD2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。