BF-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-402933

概要

ヒトFOXG1は、脳発生における終脳のパターニングおよび神経前駆細胞の維持を統括するマスター調節因子である、forkhead boxファミリーの転写因子BF-1をコードする。BF-1は主として転写抑制因子として機能し、Notch、Wnt/β-カテニン、TGF-β/BMP関連プログラムを含む発生シグナル伝達ネットワークと統合して、増殖、分化、ならびに領域アイデンティティを制御する。細胞周期関連遺伝子や神経系の運命決定因子の調節を介して、FOXG1は大脳皮質の神経新生とシナプス成熟に影響を及ぼす。FOXG1の活性または発現量（用量）の異常は、神経発達障害および神経回路機能の変容と強く関連しており、神経系リネージモデルにおける機構研究の重要な標的となっている。

BF-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるFOXG1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、FOXG1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、FOXG1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、BF-1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、BF-1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、FOXG1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• BF-1の機能に不可欠なFOXG1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、FOXG1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• BF-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびBF-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、FOXG1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  BF-1 HDRプラスミド（h）および BF-1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFOXG1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFOXG1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。