beta-catenin Lentiviral Activation Particles (h): sc-400038-LAC

CTNNB1 kodiert das humane Beta-Catenin, ein multifunktionales Protein, das cadherinvermittelte Zell-Zell-Adhäsion mit der Genregulation koppelt. Im kanonischen Wnt-Signalweg akkumuliert stabilisiertes Beta-Catenin im Zellkern und bildet mit TCF/LEF-Transkriptionsfaktoren Komplexe, um Programme zu steuern, die Proliferation, Differenzierung und die Aufrechterhaltung von Stammzellen regulieren. Seine Aktivität wird durch den APC–AXIN–GSK3β-Destruktionskomplex begrenzt, der die Beta-Catenin-Spiegel an einen phosphorylierungsabhängigen Abbau koppelt. Eine fehlregulierte CTNNB1-Signalgebung und veränderte Dynamiken an Zellkontakten werden umfassend in der Tumorbiologie, bei Entwicklungsstörungen und in der fibrosebedingten transkriptionellen Umprogrammierung untersucht.

beta-catenin Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente CTNNB1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

beta-catenin Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der CTNNB1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen beta-catenin-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen CTNNB1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.